AAT Bioquest BCFL AM*BCECF zhuo越替代品

AAT Bioquest  21190  RatioWorks™BCFL AM*BCECF的 zhuo越替代品*

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AAT Bioquest BCFL AM*BCECF zhuo越替代品-常備現貨

美國AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學研究、診斷研發及藥物開發的科學家研發、生產和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學檢測領域，包括吸收（顏色），熒光和發光技術。AAT Bioquest的產品幫助 quan 世 jie 的科學家和生物醫藥研究者更好的了解生物化學，免疫學，細胞生物學和分子生物學等領域。AAT Bioquest會不斷介紹新產品，快速的豐富各個領域的產品。

AAT Bioquest  21190  RatioWorks™BCFL AM*BCECF的 zhuo越替代品* 1mg，產品簡介：

產品品牌：AAT Bioquest

產品貨號：21190

產品名稱：RatioWorks™BCFL AM*BCECF的 zhuo越替代品*

產品規格：1mg

AAT Bioquest BCFL AM*BCECF zhuo越替代品-常備現貨 

AAT Bioquest  21190  RatioWorks™BCFL AM*BCECF的 zhuo越替代品* 1mg，產品說明：

內pH在許多細胞事件中起著重要的調節作用，包括細胞生長、鈣調節、酶活性、受體介導的信號轉導、離子轉運、內吞作用、趨化性、細胞粘附和其他細胞過程。近年來，pH敏感熒光染料已廣泛用于監測細胞內pH值的變化。使用熒光pH指示劑的成像技術還允許研究人員以更高的空間分辨率和采樣密度研究這些過程，而使用其他技術（如微電極）可以實現。其中，2'，7'-雙-（2-羧乙基）-5-（和-6）-羧基熒光素（BCECF）是 zui shou huan ying 的pH探針，因為它可用于按比例監測細胞pH值。然而，所有商用BCECF AM都是至少三種異構體的復雜混合物，批次間的比例不同，使BCECF應用復雜化。BCFL的開發是為了克服與BCECF AM相關的這種異構體困難。作為BCECF，BCFL表現出pH依賴性的雙激發，與BCECF基本相同。它的pKa為~7.0，也與BCECF相同。與BCECF一樣，BCFL的雙激發光譜具有454 nm的等吸點，應使BCFL成為良好的激發比pH指示劑。BCFL比率成像使細胞內pH測定基本上獨立于幾個可變因素，包括染料濃度，光程長度，細胞泄漏和光漂白率。BCFL，AM是單一異構體，使得pH測量比BCECF，AM更具重現性，BCECF，AM由許多不同的異構體組成。

平臺

熒光顯微鏡

Excitation單一： FITC比率：AmCyan/FITC

Emission單一： FITC比率：AmCyan/FITC

推薦板 黑色墻壁/透明底部

熒光酶標儀

Excitation：430, 505

Emission：535

Cutoff：515

推薦板：黑色墻壁/透明底部

儀器規格：底部讀取模式

儲備溶液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復凍融循環。

比率工程™ BCFL AM 庫存解決方案

在高質量無水DMSO中制備10至20 mM的RatioWorks™ BCFL AM儲備溶液。

工作溶液的制備

RatioWorks™ BCFL AM 工作解決方案

在實驗當天，將RatioWorks™ BCFL AM溶解在DMSO中或將指示劑儲備溶液的等分試樣解凍至室溫。在您選擇的緩沖液（例如，Hanks和Hepes緩沖液）中制備5至50μM的RatioWorks™ BCFL AM工作溶液。

注意 非離子洗滌劑Pluronic® F-127可用于增加AM酯的水溶性。在染色緩沖液中，最終的Pluronic® F-127濃度應約為0.02%。各種Pluronic® F-127產品可以從AAT Bioquest購買。避免在Pluronic® F-127存在下長期儲存AM酯。

注意 如果您的細胞含有有機陰離子轉運蛋白，則可以將丙磺shu（1-2 mM）添加到染料工作溶液中（最終孔濃度為0.5-1 mM），以減少脫酯指示劑的泄漏。多種ReadiUse™丙磺shu產品，包括水溶性、鈉鹽和穩定溶液，均可從AAT Bioquest購買。

實驗方案樣本

以下是將RatioWorks™ BCFL AM加載到活哺乳動物細胞中的推薦方案。此協議僅提供指南，應根據您的具體需求進行修改。

1.    根據需要準備活細胞。

2.    第二天，將 100 μL/孔（96 孔板）或 25 μL/孔（384 孔板）的 RatioWorks™ BCFL AM 工作溶液加入細胞板中。

注意 如果您的化合物干擾血清，請在上樣染料前用新鮮的HHBS緩沖液（100

孔板為96 μL/孔，25孔板為384 μL/孔）替換生長培養基。

3.    將裝載染料的板在37°C的細胞培養箱中孵育30至60分鐘。

4.    用您選擇的HHBS或緩沖液替換染料工作溶液，以去除任何多余的探針。

5.    使用 HHBS 或您選擇的緩沖液制備復合板。

6.    根據需要運行pH測定，并使用配備FITC濾光片組的熒光顯微鏡或熒光板讀數器在Ex / Em = 490 / 535 nm截止值515 nm的同時測量熒光。對于比率測量，在Ex/Em時監測熒光1= 430/535 nm 截止值 515 nm 和防爆/電磁2= 505/535 nm 截止值 515 nm。

注意化合物添加量為 50 μL/孔（96 孔板）或 25 μL/孔（384 孔板）。

注意 測定應在化合物添加后 3 至 5 分鐘內完成。但是，建議至少 8 分鐘進行數據收集。

產品訂購信息：

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